Protein Koncentrationsräknare

Kategori: Biologi
Typiska värden ligger mellan 0.5 och 2.0
Standardkuvetter har en väglängd på 1 cm
Om provet spätts ut före mätning (t.ex. 5 = 1:5 utspädning)

Koncentrationen av protein med hjälp av absorbans vid 280 nm (A280) bestäms med hjälp av Beer-Lamberts lag:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

där:

  • \( C \) = Proteinkoncentration (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbans vid 280 nm
  • \( \epsilon \) = Extinktionskoefficient (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Kyvettens banlängd (cm)

Vad är Protein Concentration Calculator?

Protein Concentration Calculator hjälper till att bestämma proteinkoncentration med olika metoder, inklusive:

  • Absorbans vid 280 nm (A280): En snabb och icke-destruktiv metod baserad på aromatiska aminosyror.
  • Bradford-analys: En kolorimetrisk metod som använder färgbindning.
  • BCA (Bicinchoninic Acid) Assay: En metod som bygger på kopparreduktion och kolorimetrisk detektion.
  • Lowry-analys: En väletablerad metod som använder protein-koppar-interaktioner.

Hur man använder kalkylatorn

Följ dessa steg för att beräkna proteinkoncentration:

  • Välj mätmetod (A280, Bradford, BCA eller Lowry).
  • Ange de nödvändiga värdena, såsom absorbans, utspädningsfaktor och extinktionskoefficient (om det behövs).
  • Om du använder en standardkurvmetod (Bradford, BCA eller Lowry), ange kurvparametrarna.
  • Klicka på knappen "Beräkna" för att få koncentrationsresultatet.

Fördelar med att använda kalkylatorn

  • Sparar tid genom att automatisera koncentrationsberäkningar.
  • Stöder flera mätmetoder för flexibilitet.
  • Inkluderar en utspädningskalkylator för att förbereda specifika koncentrationer.
  • Minskar mänskliga fel vid manuella beräkningar.

Vanliga frågor

1. Hur exakt är metoden med absorbans (A280)?

Metoden med A280 är generellt exakt för rena proteiner men kan påverkas av föroreningar som nukleinsyror.

2. Kan jag använda Bradford-analysen för alla proteiner?

Bradford-analysen fungerar bra för de flesta proteiner men kan ge varierande resultat beroende på proteinkompositionen.

3. Vad är fördelen med BCA-analysen?

BCA-metoden är mer kompatibel med detergenter och har ett bredare linjärt område än Bradford.

4. Hur väljer jag rätt extinktionskoefficient för A280?

Använd publicerade värden för kända proteiner eller beräkna extinktionskoefficienten baserat på aminosyrasammansättningen.

5. Varför behöver jag en utspädningsfaktor?

Om ditt prov späds ut före mätning måste du multiplicera den beräknade koncentrationen med utspädningsfaktorn för att få rätt slutkoncentration.